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牛血清在培養(yǎng)的過(guò)程中出現(xiàn)“小黑點(diǎn)”的現(xiàn)象該怎么防止呢?

更新時(shí)間:2020-10-12   點(diǎn)擊次數(shù):1410次
   牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。牛血清在培養(yǎng)基中扮演著這么多的角色,那么它在培養(yǎng)的過(guò)程中也會(huì)出現(xiàn)一些的問(wèn)題,比如說(shuō):在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)一個(gè)個(gè)“小黑點(diǎn)”的現(xiàn)象,這是怎么一回事呢?
  我們一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中有黑點(diǎn),我們先不要著急,也不要驚慌,要搞清楚這個(gè)黑點(diǎn)是什么?什么形成的?
  首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)等。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒(méi)有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
  首先可能是細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老,破碎的細(xì)胞殘骸;再有可能就是血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;然后可能是配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);其次可能是亦有可能是配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格(可應(yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn));后可能是培養(yǎng)的原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)(可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除)。
  那么我們?nèi)绾畏乐购邳c(diǎn)生成呢?通過(guò)我們多年的從業(yè)經(jīng)驗(yàn),凱學(xué)生物科技認(rèn)為至少要做到以下幾點(diǎn):
  (1)盡可能地減少血清凍融次數(shù);
  (2)培養(yǎng)基無(wú)需37℃水浴;
  (3)培養(yǎng)基保持*PH值7.0- 7.2;
  (4)嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),容器定期刷洗;
  (5)掌握細(xì)胞傳代的zui時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過(guò)老。
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